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전분 분해성 산업용 Saccharomyces cerevisiae에서 Achlya bisexualis β-Amylase의 발현 특성 규명

미생물학회지 2008년 44권 3호 p.264 ~ 269
이옥희 ( Lee Ok-Hee ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과

진종언 ( Chin Jong-Eon ) - 동강대학교 피부미용과
임미현 ( Lim Mi-Hyun ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과
김지혜 ( Kim Ji-Hye ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과
유은혜 ( Yoo Eun-Hye ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과
고현미 ( Ko Hyun-Mi ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과
배석 ( Bai Suk ) - 전남대학교 자연과학대학 생물학과

Abstract

β-Amylase를 생산하여 전분 분해능을 갖는 산업용 효모를 개발하기 위해 산업용 Saccharomyces cerevisiae에서 Achlya bisexualis β-amylase (BAMY) 유전자를 ADC1 promoter에 연결하여 구성적으로 발현시켰다. 효모의 형질 전환은 δ-서열을 재조합 부위로 하는 integration 시스템을 이용하였다. Integration 시스템의 세균 유전자 부분은 제거되고 BAMY 유전자와 δ-서열을 갖고 있는 짧은 integrative cassette를 제조하였다. BAMY 유전자를 발현하는 재조합 S. cerevisiae 형질전환체는 세포외 배지로 45 kDa의 β-amylase를 분비하였고, β-amylase 활성은 A. bisexualis에 비해 약 18.5배 높았다. 형질전환체에 다중도입된 BAMY 유전자는 비선택배지에서 100세대 생장 후에도 안정되게 유지되었다. 각종 전분을 기질로 했을 때 β-amylase의 활성은 soluble starch를 기질로 했을 경우와 유사하게 높았고, 가수분해산물 분석 결과 maltose가 주 분해산물이었다.

키워드

Achlya bisexualis;β-amylase;industrial Saccharomyces cerevisiae
원문 및 링크아웃 정보
 
등재저널 정보
KCI