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Fibrin 분해 효소-생성 Bacillus subtilis subsp. subtilis BYSnat3의 분리 및 특성

Isolation and characterization of the fibrinolytic enzyme-producing Bacillus subtilis subsp. subtilis BYSnat3

미생물학회지 2019년 55권 4호 p.344 ~ 349
조예성 ( Jo Ye-Seong ) - 동국대학교 대학원 생명과학과

최다연 ( Choi Da-Yeon ) - 동국대학교 의생명공학과
김민주 ( Kim Min-Ju ) - 동국대학교 의생명공학과
한영환 ( Han Yeong-Hwan ) - 동국대학교 의생명공학과

Abstract

그람 양성, 포자형성, fibrin 분해 세균을 꿀벌이 포함된 특이적으로 높은 탁도의 벌꿀에서 분리하였다. 16S rDNA 염기서열 분석, API 50 CHB 및 형태?생리학적 특성에 따라, 분리균은Bacillus subtilis subsp. subtilis BYSnat3로 동정?명명하였다.
30°C의 LB 액체배지에서 진탕 배양시, 사용된 Bacillus속 공시균주와 비교시 분리균의 생육 및 fibrin 분해 활성이 더 우수하였다. 사용된 5종의 배지 중 trypticase soy broth (TSB)에서 가장 우수한 생육 및 fibrin 분해 활성을 나타내었다. TSB 배지 사용시, 배양 온도 및 배지 초기 pH는 각각 25°C 및 7에서 우수한결과를 보여주었다. Fibrin plate 방법을 이용하여 배양 여액(조효소액)을 사용하였을 때, 온도 37°C에서, pH 7 범위에서가장 우수한 fibrin 분해 활성을 나타내었다. 배양 18 및 48시간에서의 FE 비활성도(U/mg)는 각각 51.5 및 109.9이었다.

The Gram-positive, endospore-forming, and fibrin-degrading bacterium was isolated from the relatively high turbid honey containing honey bees. Based on 16S rDNA sequences analysis, the results of API 50 CHB and some morphological-physiological characteristics, the isolate was identified and named as Bacillus subtilis subsp. subtilis BYSnat3. The cell growth and fibrinolytic enzyme (FE) activity of the isolate was better than those of Bacillus spp. used in this study, when the cells were grown at 30°C in LB broth. Among the five media used, trypticase soy broth (TSB) showed the best cell growth and FE activity. For cell growth of the isolate in TSB, optimal temperature and pH was 25°C and 7, respectively. FE activity was determined using the fibrin plate method. As the culture filtrate was used as the crude enzyme solution, the optimal temperature and pH was 37°C and 7, respectively. Specific FE activity (U/mg) at cultivation time of 18 h and 48 h was 51.5 and 109.9, respectively.

키워드

Bacillus subtilis subsp. subtilis; characterization; fibrinolytic enzyme activity; identification; isolation
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