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전골수구백혈병 세포주 HL-60에 대한 Eugenol의 세포자멸사(Apoptosis) 유도 효과

Eugenol Induces a Reactive Oxygen Species-mediated Apoptosis in HL-60 Human Promyelocytic Leukemia Cells

대한혈액학회지 2005년 40권 2호 p.65 ~ 74
길욱현 ( Kil Uk-Hyun ) - 가톨릭대학교 의과대학 성가병원 혈액내과

이기현 ( Lee Kee-Hyun ) - 가톨릭대학교 의과대학 성가병원 혈액내과
이경태 ( Lee Kyung-Tae ) - 경희대학교 약학대학
진종률 ( Jin Jong-Youl ) - 가톨릭대학교 의과대학 성가병원 혈액내과

Abstract

배경: Eugenol은 정향나무(Eugenia caryophyllata)로부터 분리된 정유의 주요 성분이며 주로 치과용 국소 마취, 진통제로 전통적으로 사용되어 진다. 본 연구는 전골수구백혈병 세포주(human promyelocytic leukemia cells, HL-60)에서의 eugenol의 세포 독성 효과, apoptosis의 유도와 apoptosis에 관련되는 경로를 조사하였다.

방법: HL-60 세포에 eugenol을 처리하여 propididum 과 rhodamin 123 이중염색과 2’,7’-dicholorofluore scindiacetate를 이용하여 반응 산소 물질(reactive oxygen species, ROS)과 미토콘드리아 막전압(mitocho drialmembrane potential, △Ψm)을 평가하였다.

결과: Eugenol은 apoptosis의 강력한 유도물질이고 반응 산소 물질의 생성을 통해 apoptosis 신호를 전달시켜 미토콘드리아 투과성 전이(mitochondrial permea bility transition, MPT)와 세포질내로의 cytochrome c의 방출을 유도하였다. 반응 산소 물질의 생성, 미토콘드리아의 변화, 그에 따른 eugenol로 처리한 세포에서의 apoptotic cell death는 항산화제인 N-acetylcystein (NAC)에 의해서 차단되었다.

결론: 저자들은 본 연구에서 eugenol 이 미토콘드리아 투과성 전이를 매개로 한 반응 산소 물질과 cytochrome c 방출을 유도함을 확인하였다.

Background: Eugenol is a major component of essential oil isolated from the Eugenia caryophyllata (Myrtaceae), which has been widely used as a traditional medicine. In this study, we investigated the effects of eugenol on the cytotoxicity, induction of apoptosis, and the putative pathways of its actions in human promyelocytic leukemia cells (HL-60).

Methods: After applying eugenol on cultured HL-60, changes in the mitochondrial membrane potential were examined by monitoring the cells after double staining with propidium iodide and rhodamin 123 and 2’,7’-Dicholorofluorescin diacetate was used to measure of levels of reactive oxygen species (ROS)

Results: We show that eugenol is a potent inducer of apoptosis and that it transduces the apoptotic signal via ROS generation, thereby inducing mitochondrial permeability transition (MPT) and cytochrome c release to the cytosol. ROS production, mitochondrial alteration, and subsequent apoptotic cell death in eugenol-treated cells were blocked by the antioxidant N-acetylcystein (NAC).

Conclusion: Taken together, the present study demonstrated that eugenol induces the ROS-mediated mitochondrial permeability transition and resultant cytochrome c release.

키워드

Eugenol;HL-60 cells;Apoptosis;Reactive oxygen species;Cytochrome c
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