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대하(帶下) 처방 3종의 항염, 항소양, 항균 효능에 관한 실험 연구 : 은화사간탕(銀花瀉肝湯), 소복축어탕(少腹逐瘀湯), 완대탕(完帶湯)

An Experimental Study on the Anti-inflammatory, Anti-pruritic and Anti-microbial Effects of the Three Herbal Prescription : Eunhwasagan-tang (EST), Sobokchukeo-tang (SCT), Wandae-tang (WDT)

대한한방부인과학회지 2019년 32권 3호 p.32 ~ 56
이은규 ( Lee Eun-Kyu ) - 열린부부한의원

박찬욱 ( Park Chan-Wook ) - 상쾌한365한의원
김수현 ( Kim Soo-Hyeon ) - 동신대학교 한의과대학 한방부인과교실
최유진 ( Choe Yoo-Jin ) - 동신대학교 한의과대학 한방부인과교실
박경미 ( Park Kyung-Mi ) - 동신대학교 한의과대학 한방부인과교실
양승정 ( Yang Seung-Jeong ) - 동신대학교 한의과대학 한방부인과교실
조성희 ( Cho Seong-Hee ) - 동신대학교 한의과대학 한방부인과학 교실

Abstract

목적 : 帶下 처방인 銀花瀉肝湯 (Eunhwasagan-tang ; EST), 少腹逐瘀湯 (Sobokchukeo-tang ; SCT), 完帶湯 (Wandae-tang ; WDT)의 항염, 항소양, 항균 효능을 in vitro에서 알아보기 위함이다.

방법 : RAW264.7 세포, MC/9 세포, PC12 세포를 사용하여 세포생존율을 측정하여 세포독성 여부를 판별한 후 Nitric Oxide (NO), Cytokine, Prostaglandin E₂ (PGE₂), Leukotriene B₄ (LTB₄)의 생성량과 유전자 발현량을 측정하고 Immunoblot 분석을 통해 항염 효능을 평가하였고, Histamine, Acetylcholine (ACh), Acetylcholinesterase (AChE), Substance P 생성량을 측정하여 항소양 효능을 평가하였으며, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus niger에 대한 생장억제환 크기를 측정하여 항균 효능을 평가하였다.

결과 : EST, SCT, WDT는 모두 NF-κB signaling을 조절하고 NF-κB 발현량을 감소시켰으며, 이로 인해 NO의 활성을 조절하는 iNOS와 PGE2의 활성을 조절하는 COX-2의 유전자 발현량이 감소되었고 결과적으로 이들에 의해 조절되는 cytokine들 (IL-1β, IL-2, IL-6, TNF-α, PGE2, LTB4)의 생성량을 감소시키는 항염증 효능이 검증되었다. 또한 염증반응에 관여하고 소양증의 중재자로서 중요한 역할을 하는 histamine과 소양반응을 감지하여 뇌에 반응을 유도하는 신경전달물질인 acetylcholinesterase, acetylcholine, substance P들을 감소시켜 항소양증에 대한 효능 역시 검증이 되었다. 마지막으로 체내 세균성 질환을 유도하는 Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus niger의 생장을 억제하는 항균 효능이 확인되었다.

Objectives : The purpose of this study was to investigate the in vitro anti-inflammatory, anti-pruritic and antimicrobial effects of the three herbal prescription (EST, SCT, WDT), which has been traditionally used for treating leukorrhea induced by various infections in the female genital tract.

Methods : In this experiment, the anti-inflammatory effects were evaluated by Nitric oxide (NO), Interlukine-1β (IL-1β), Interlukine-2 (IL-2), Interlukine-6 (IL-6), Tumor necrosis factor-α (TNF-α), Prostaglandin E₂ (PGE₂), Leukotriene B₄ (LTB₄) production amount and Inducible nitric oxide synthase (iNOS), Nuclear factor kappa B (NF-κB), Cyclooxygenase-2 (COX-2) gene expression levels in RAW264.7 cells. And the anti-pruritic effects were evaluated by Histamine, Acetylcholine (ACh), Acetylcholinesterase (AChE), Substance P production amount in MC/9 and PC12 cells. The anti-microbial effect was measured by inhibition zone diameter on Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and Aspergillus niger.

Results : As a result of measuring anti-inflammatory efficacy, IL-1β, IL-2, IL-6, TNF-α, PGE₂, and LTB₄ production amounts were significantly reduced in the EST, SCT, WDT extraction groups compared with the control group, and significantly decreased the amount of NF-κB, iNOS, and COX-2 gene expression and the amount of Phospho-Inhibitor kappa B alpha (p-IκB-α) / Inhibitor kappa B alpha (IκB-α) and NF-κB p65 protein expression. In addition, As a result of measuring the anti-pruritic effect, the amounts of histamine, ACh and Substance P were significantly decreased, and AChE production was slightly decreased, but it’s significance did not appear. Finally the anti-microbial effects of EST, SCT, WDT extraction groups against Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans and Aspergillus niger was inhibited, however the growth of Escherichia coli and Staphylococcus aureus was not inhibited.

Conclusions : These data suggest that EST, SCT, WDT can be used to treat patients with leukorrhea.

키워드

은화사간탕; 소복축어탕; 완대탕; 항염; 항소양; 항균
Eunhwasagan-tang (EST); Sobokchukeo-tang (SCT); Wandae-tang (WDT); Anti-inflammatory; Anti-pruritic; Anti-microbial
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