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Sulindac에 의한 대장암 세포주 HT-29 세포의 세포사멸 기작 연구-미토콘드리아 통로를 중심으로

Sulindac-induced Apoptosis without Oligonucleosomal DNA Fragmentation in HT-29 Cells-Its Special References to Mitochondrial Pathway -

대한대장항문학회지 2004년 20권 4호 p.191 ~ 198
박기재 ( Park Ki-Jae ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실

권육 ( Kwon Yuk ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
김성흔 ( Kim Sung-Heun ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
김민찬 ( Kim Min-Chan ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
최홍조 ( Choi Hong-Jo ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
김영훈 ( Kim Young-Hoon ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
조세헌 ( Joh Se-Heon ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
정갑중 ( Jung Ghap-Joong ) - 동아대학교 의과대학 외과학교실
김성현 ( Kim Sung­Hyun ) - 동아대학교 의과대학 내과학교실
권혁찬 ( Kwon Hyuk­Chan ) - 동아대학교 의과대학 내과학교실

Abstract


Purpose: This study was undertaken to reveal the molecular mechanism underlying sulindac-induced apoptosis in the human colon cancer cell line HT-29 (mutant p53).

Methods: Apoptosis was determined by using Hoechst 33342 staining, and translocation of proteins was established by using immunofluorescence, immunoelectron microscopy, and Western blotting after ultra- fractionation.

Results: This type of apoptosis was associated with decreased mitochondrial membrane potential, a translocation of the apoptosis-inducing factor (AIF) to the nucleus, and morphological evidence of nuclear condensation. However, DNA electrophoresis did not elucidate the ladder pattern of DNA fragments. Instead, a pulse-field gel electrophoresis showed that sulindac led to disintegration of nuclear DNA into-high- molecular-weight DNA fragments of about 100~300 kbp.

Conclusions: Our findings indicate that sulindac induces large-scale DNA fragmentation, suggesting a predominantly AIF-mediated cell-death process, through translocation of the AIF to the nucleus in HT-29 cells. J Korean Soc Coloproctol 2004;20:191-198

키워드

세포사멸;대장암세포주 HT-29; 세포사멸 유발인자;고분자 DNA조각
Apoptosis;Colon cancer cell line HT-29;AIF;HMW DNA fragmentation
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