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Naegleria fowleri에 대한 단세포군 항체의 생산과 그 특성에 관한 연구

The production and characterization of anti-Naegleria fowleri monoclonal antibodies

Korean Journal of Parasitology 1992년 30권 1호 p.33 ~ 42
이기헌 (  ) - 한양대학교

민덕영 (  ) - 한양대학교

Abstract

자유생활 아메바인 Naegleria fowleri는 비강을 통해 인체에 들어와 출혈성 수막뇌염을 일으켜 감염된 사람의 대부분을 일주일 이내에 사망하게 하는 원충이다. 이 실험에서는 N. fowleri에 특이한 단세포군 항체를 만들어 이의 특성 및 그 이용 가능성을
알아보고자
하였다.
7종류의 단세포군 항체(Nf 1, Nf 2, Nf 256, Nf 279, Nf 27, Nf 154, Nf 137)를 제조하였는데 각각의 isotype은 IgG1이 두 종류(Nf 27, Nf 154), IgG3가 1종류 (Nf 137), IgA가 4종류(Nf 1, Nf 2, Nf 256, Nf 279)이었다. 이들 항체를 N. fowleri와 다른 종류의
아메바를
항원으로 하여 효소표식 면역검사법을 시행하여 Nf 1 및 Nf 256 항체를 제외한 5종류의 항체가 N. fowleri에 특이한 항체임을 확인하였다. 또한 간접 형광항체법을 통하여 Nf 256 항체를 제외ㅎ나 6종류의 단세포군 항체가 세포막의 일부에 결합하였음을
관찰하였다.
Nf
154 항체를 이용한 immunoperoxidase 염색에서도 세포막의 반응을 관찰하였다.
단세포군 항체가 N. fowleri를 응집시키는지 알아보고자 항체를 N. fowleri 영양형과 반응시켰더니 Nf 27 항체를 제외한 5종류의 단세포군 항체에 의해 응집이 일어남을 알수 있었으며 응집된 영양형을 보체로 처리한 후 CGVS 배지에서 배양하였더니 영양형의
증식이
억제되었다. 또한 2종류의 단세포군 항체 (Nf 2, Nf 154)는 조직 세포(Chinese hamster ovary cell: CHO)에 대한 N. fowleri)의 세포독성을 저하시켰다. 단세포군 항체와 반응하는 항원의 분자량을 알아보고자 EITB(Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot)를
시행하였는데 Nf 279 항체는 25 kDa 및 28 kDa, Nf 154 항체는 43 kDa, Nf 137 항체는 29 kDa에 해당되는 분획에서 항원항체반응을 나타내었다.
이상의 성적을 종합하면 N. fowleri에 대한 7종류의 IgG., IgG3 및 IgA 단세포군 항체를 생산하였다. 그중 Nf 256 항체를 제외한 6종류는 N. fowleri의 세포막 성분중 28 kDa-43 kDa의 항원과 반응하는 특이한 항체임을 관찰할 수 있었다. 또한 이 단세포군
항체들은
영양형을 응집시키며, 시험관 내에서의 증식을 억제시키고 CHO 세포에 대한 N. fowleri의 세포 독성을 저하시키는 성질을 가지고 있음을 알 수 있었다.

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