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애플망고 잎의 추출물의 항산화 및 대식세포(RAW 264.7)에서 iNOS, COX-2 발현 저해 효과

Antioxidant effect and iNOS, COX-2 Expression Inhibition on RAW 264.7 Cell of Mangifera indica L. Leafs

Journal of Life Science 2020년 30권 9호 p.783 ~ 790
유단희, 이인철,
소속 상세정보
유단희 ( Yoo Dan-Hee ) - Seowon University Industry-Academic Collaboration Founation
이인철 ( Lee In-Chul ) - Seowon University Department of Bio-Cosmetic Science

Abstract

본 연구는 애플망고 잎 추출물의 항산화 및 항염증에 활성을 검증하여 연구하였다. 총 폴리페놀 함량은 Folin- Denis의 방법에 의해 측정하였다. 그 결과 애플망고 잎의 열수와 70% 에탄올 추출물은 각각 440.83±1.02, 475.63± 1.3 mg/100 g TAE의 함량을 나타내었다. 항산화 활성을 측정하기위해 전자공여능 측정과 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) 라디칼 소거능 활성을 측정하였으며, 모든 추출물이 우수한 효과를 나타내었다. 대식세포내에서 애플망고 잎 추출물의 세포 생존율을 MTT assay의 방법으로 측정하였다. 세포의 독성이 나타나지 않은 농도구간에서 이하의 세포실험을 진행하였다. 항염증 활성을 효과적으로 측정하기 위해 LPS로 염증반응을 유도시키고 Griess assay를 이용해 nitric oxide를 측정하였다. 그 결과 애플망고 잎 추출물은 농도의존적으로 NO의 생산을 억제함을 나타내었다. LPS로 유도된 RAW 264.7세포에서 iNOS와 COX-2의 염증인자 생성억제를 mRNA발현 억제를 RT-PCR을 통해 확인하였다. 따라서 본 연구에서는 애플망고 잎 추출물의 항산화 및 항염증 활성의 우수한 효과를 확인하였고, 그 결과 천연소재로서의 유용성과 함께 화장품의 기능성소재로서의 활용가능성을 확인하였다.

The present study investigates the antioxidant and anti-inflammatory activities of Mangifera indica L. leaf extract. The total polyphenol content was measured using the Folin-Denis method. Results showed that the M. indica L. leaf extract of water and 70% ethanol showed a content of 440.83±1.02, 475.63±1.3 mg/100 g tannic acid equivalent. To assess antioxidant activity and electron-donating ability, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity were measured, and all extracts were found to be highly efficacious. To assess cell viability of the extract from M. indica L. leaf on macrophage cells (RAW 264.7), a 3-[4,5-dimethyl-thiazol-2- yl]-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide assay was performed. The following experiments were conducted in section where cells was not shown of toxicity. In order to effectively determine anti-inflammatory activity, inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells was examined using a Griess assay. The result showed that M. indica L. leaf extract concentration-dependently inhibited NO production. M. indica L. leaf extract was measured using Western blot, reverse transcription- polymerase chain reaction (RT-PCR) that to find the production of pro-inflammatory factor on stimulated RAW 264.7 cells of LPS. According to the results of this study, the M. indica L. leaf extract showed excellent effectiveness in antioxidant and anti-inflammatory activity, thus confirming its usability as a natural material and a functional raw material for cosmetics.

키워드

Anti-inflammatory; antioxidant; cycloxygenase-2; Mangifera indica L. leaf; the inducible NOS

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