Radioiodine Labelling of Insulin Using Dimethylsulfoxide as a Labelling-Aid
원자력학회지 1977년 9권 4호 p.203 ~ 210
Kim Jaerok, 김영희,
소속 상세정보
( Kim Jaerok )
Korea Atomic Energy Research institute
김영희 ( Kim Young-Hee )
Korea Atomic Energy Research institute
KMID : 0371819770090040203
Abstract
디메틸썰폭사이드를 표지보조제로 사용하여 방사면역측정용 ^(125)I 표지인슈린을 효과적으로 만들 수 있었다. 디메틸썰폭사이드 조금을 통상의 표지반응 혼합물에 첨가하여 반응시간을 조절하여 보았더니 표지반응속도는 약간 느렸으나 이렇게 하여 얻은 포지인슈린은 항체와의 결합능이 좋았으며 표준곡선을 점시했을 때 큰 구배(句配)를 보였다. 표지반응수율도 반응시간을 1분으로 늘림에 따라 약 30%로 늘어났다. 평균 항체결합능(B/F)의 증가는 일정항체 희석비율하에서 표지보조제없이 표지한 인슈린을 쓴 때가 1.5인데 반해 표지보조제를 쓴 경우는 2.5로서 약 70%의 향상을 보였다.
핵자기공명분광법으로 표지혼합물에 첨가한 디메틸썰폭사이드는 클로라민티에 의해 디메틸썰폰으로 산화된다는 것을 확인하였다.
Stagg 등의 결과와 대략 같은 이 실험결과를 디메틸썰폭사이드와 인슈린분자 중의 유황결합이 클로라민티에 의해 경쟁적 산화를 받는 것으로 보고 이를 토의하였다.
Using dimethylsulfoxide (DMSO) as a labelling aid, insulin-211 of radioi-mmunoassay use has been effectively prepared. A small amount of DMSO was added to usual labelling mixture and the reaction time was controled. The labelled insulin obtained in such a way showed improved bindabilities to the antibody and thus expressed larger dose-gradients in the plots of standard dose-response curves even though the labelling rate was decreased to some extent. However, by extending the reaction time to about 1 min, average labelling yield of 30% could be obtained. The average increase of bindability (B/F) in definite antiserum dilution was 2.5 comparing with 1.5 obtained in the absence of DMSO. Thus, the net bindability increase was 70% of those obtained in the absence of DMSO.
By means of a NMR spectrometry, it has been confirmed that the DMSO in the labelling mixtutre is converted to dimethylsulfone by chloramine-T. The results, generally agreed with the Stagg´s postulation, were discussed in view of a competitive oxidation of DMSO with disulfide linkages of the insulin molecule by the chloramine-T.
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